微生物实验前的无菌稀释液准备与灭菌方法

微生物实验前的无菌稀释液准备与灭菌方法

微生物实验前，我们需要提前准备无菌稀释液（通常为0.85%无菌生理盐水）。下面分享下实验无菌生理盐水的配制与灭菌过程。

蒸馏水提前准备：按照蒸馏器使用方法进行操作，制取蒸馏密封备用。

0.85%生理盐水的配制：

称取8.5g氯化钠溶于1000ml的蒸馏水，用玻璃搅拌棒搅拌均匀，使之快速溶解均匀。

生理盐水的分装：

①将溶液分别倒入具有225ml刻度的稀释液容器中。

②用10ml吸管和洗耳球将溶液吸取9ml分别移至试管中，并用胶塞塞住试管口，至于试管架中。

生理盐水的灭菌：

调整确定灭菌时间与温度。

灭菌温度：121℃

灭菌时间：15min

取出生理盐水冷却：

关闭电源，打开高压灭菌锅盖子，取出灭菌后的生理盐水，放置冷却区域自然冷却。

备注：此处所采用的为全自动高压灭菌锅。如果使用老式高压灭菌锅，关闭电源，打开放气阀，将气体至排空，直至压力降为0，才能打开灭菌锅，否则将导致安全事故发生。

将冷却后的无菌生理盐水放于冷藏冰箱内，并做好标识：配制日期、配制人、使用截止日期等

一般保存3-5天，具体参考公司化验室相关文件要求。

备注：做微生物实验时，同时进行空白实验，再次验证以及确保无菌生理盐水符合要求（空白实验结果：平皿培养基上无菌生长，如有菌生长，则此次实验结果无效，需查找原因并纠正，重新进行实验操作）。